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脂蛋白的分離

閱讀次數(shù):1665   發(fā)布時(shí)間:2012/9/10 9:01:42

昆蟲(chóng)有一個(gè)開(kāi)放的循環(huán)系統(tǒng)血液可以簡(jiǎn)單地通過(guò)一個(gè)切口在身體*方便的你應(yīng)把一條腿讓血滴到冷的玻璃燒杯以獲得的收益這是必要的,排除血液注入緩沖進(jìn)入體腔實(shí)驗(yàn)過(guò)程是下圖所示

搬遷后的血細(xì)胞,溴化鉀添加到形成44%個(gè)解決方案這是分層與磷酸鹽緩沖液(公共廣播公司形成一個(gè)密度梯度離心*終所有的蛋白質(zhì)上浮或下沉的區(qū)域對(duì)應(yīng)的密度有一個(gè)低密度脂蛋白黃色漂浮高于non-lipoproteins包括綠色cyanoprotein分離蛋白是分離對(duì)個(gè)人的分?jǐn)?shù)密度是由折射率,蛋白質(zhì)含量和組成Brad ford法和電泳分別脂質(zhì)成分可以分析薄層和氣相色譜法

實(shí)驗(yàn)議定書(shū)

1天出血和離心

2天分餾折射率和透析

3天凍干

1天:出血和離心

注意:你需要戴上手套,整個(gè)程序

每一需要10 - 15蝗蟲(chóng)

1。2 - 5毫升的公共電視網(wǎng)在一個(gè)干凈的100毫升燒杯和添加25µ升200毫米磺酰氟

注意安全。劇毒的

2。流血蝗蟲(chóng)持有所有的腿和翅膀一條腿靠近胸部見(jiàn)圖片)確保沒(méi)有昆蟲(chóng)的唾液進(jìn)燒杯已經(jīng)準(zhǔn)備好紙巾口水)

3。輕輕注入幾百微升通過(guò)部分皮下

不要傷害腸道

4。沖洗胡蘿卜素仔細(xì)進(jìn)行擠壓胸腔部位輕輕收集血液從10 - 12蝗蟲(chóng)

5。流血蝗蟲(chóng)在罐子里當(dāng)完成了出血,movet罐子的電冰箱處理過(guò)動(dòng)物尸體在稍后的日期

6。使解決~ 15毫升與公共電視網(wǎng)

7。添加8.9克溴化鉀晶體,輕輕地?cái)嚢瑁?/span>用干凈的攪拌棒

8。溶解部分轉(zhuǎn)移到50毫升量筒和添加更多2 - 3毫升)公共廣播溶解溴化鉀攪拌至溶解游泳池這些解決方案,高達(dá)20毫升攪拌進(jìn)一步測(cè)量筒

9。轉(zhuǎn)移30毫升塑料注射器由夾子連接到18針針和毛細(xì)管見(jiàn)圖片)

10。流進(jìn)熱密封的離心管

11。另加20毫升注射器進(jìn)入覆蓋的

12。又熱封口溫暖起來(lái)

13。平衡樣本來(lái)自其他組必須精確分析天平、添加或刪除公共電視網(wǎng)或從如果液體是在脖子上去除尖端組織

14。金屬帽的密封的熱封口機(jī)一旦上限達(dá)到管的肩膀快速移動(dòng)的權(quán)利和與散熱片

15。將四積分50轉(zhuǎn)子相對(duì)位置和地點(diǎn),超速離心機(jī)轉(zhuǎn)子

16。確保蓋關(guān)閉打開(kāi)真空離心機(jī)設(shè)置運(yùn)行的條件10℃剎車45000時(shí)間4.5 h。

17。旋轉(zhuǎn)45000轉(zhuǎn)為4.5小時(shí)留樣一夜之間在離心機(jī)的。

2天:檢索樣本

(約2 - 3小時(shí)連續(xù)

1。運(yùn)行后結(jié)束真空等到壓力達(dá)到大氣壓力現(xiàn)在您可以刪除

2。注意任何不尋常的觀察期間或之后,法離心(例如泄漏)并記錄在離心機(jī)的書(shū)清潔室和轉(zhuǎn)子并開(kāi)始排練避免凝結(jié)在離心機(jī)

3。用一把鋒利的單刃剃刀仔細(xì)剪開(kāi)離心管

4。建立biorad餾分收集器內(nèi)容20毫升的組分分餾

5。確定密度使用折射計(jì)

6。同時(shí)測(cè)定紫外吸光度在280納米記得使用uv-permeable塑料試管(1對(duì))

7。確定的折射率發(fā)生2透析管每個(gè)約20厘米長(zhǎng))到500毫升的燒杯中充滿了區(qū)

8。離開(kāi)一個(gè)整除(300µ升)每一部分標(biāo)記修改離心透析

9。透析對(duì)~ 1升區(qū)水在寒冷的房間,改變緩沖區(qū)的一次

10。小心將整體攜脂組分(通常是3 - 5黃色分?jǐn)?shù))進(jìn)入透析管關(guān)閉了在底部有一個(gè)橙色鉗)使用巴斯德吸管

11。關(guān)閉透析確保留下足夠的擴(kuò)展空間,在透析

12。透析對(duì)4升區(qū)水在寒冷房間里過(guò)夜改變水和重復(fù)撥號(hào)

上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司是國(guó)內(nèi)首批elisa試劑盒代銷商,本公司主要經(jīng)營(yíng)的產(chǎn)品有:elisa試劑盒,生物試劑,血清,培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)品,細(xì)胞。我們長(zhǎng)期供應(yīng),與國(guó)內(nèi)國(guó)家企業(yè)合作,是值得你信賴的合作商,我們公司為了迎接國(guó)慶和中秋節(jié),從即日起,產(chǎn)品一律低價(jià)出售,回饋客戶,歡迎你的咨詢。

 
 

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